Detección temprana de mutantes de banano tolerantes o resistentes a Sigatoka negra (Mycosphaerella fijiensis, Morelet) en condiciones de vivero

Abstract

Existen varias enfermedades que atacan al banano, pero la principal es la Sigatoka negra (Mycosphaerella fijiensis, Morelet) que es una enfermedad que ataca a las hojas, reduciendo su capacidad fotosintética, bajando de esta manera los rendimientos en las haciendas. Para controlar esta enfermedad se utilizan fungicidas que causan resistencia en esta plaga; además, un gran daño al ambiente y las personas que viven y trabajan en las bananeras. Se han buscado alternativas para controlar esta enfermedad, pero se ha concluido en que el mejoramiento genético es la mejor vía. Convencionalmente llegar a obtener un nuevo genotipo resulta extremadamente difícil en este cultivo, por su esterilidad y partenocarpia, por esta razón es que se ha tomado la alternativa del mejoramiento mediante mutagénesis inducida aplicando mutagénicos físicos y químicos y complementando con la técnica de cultivo de tejidos, para obtener mutantes que presenten resistencia o tolerancia a varias enfermedades. Para este estudio se utilizaron Rayos Gamma y Ethylmethanesulfonate que son agentes, que han sido utilizados en varios estudios ya que pueden provocar mutaciones, las dosis de radiación aplicadas fueron: 0, 20, 40, 50, 60, 70, 80, 100, 120, 140, 150, 160, 180, 200, 250, 300, 350 y 500 Gy. Las dosis aplicadas de EMS fueron: 0, 0.5, 1 y 2 % por dos tiempos: 3 y 6 horas. El material vegetal utilizado para este estudio fueron meristemos apicales y microcormos del cultivar Williams (AAA) perteneciente al subgrupo Cavendish, los cuales se manejarían en condiciones in vitro y de vivero, respectivamente. Estos explantes fueron evaluados a los 30 días posteriores a la aplicación de los mutagénicos, para determinar el porcentaje de mortalidad producido por estos agentes, variable que sirvió para la determinación de la DL50, que en el ensayo con rayos gamma, en los meristemos apicales fue de 56,64 Gy en el irradiador de Quito y 58,32 Gy en el irradiador de Aloag. La DL50 en los microcormos no se pudo determinar ya que la mortalidad fue total. En el ensayo con EMS la DL50 en meristemos apicales fue de 0,83 % que representan 120 mg de EMS en la solución mutagénica o 120 uL de EMS en la solución 4,83 mM/L y en los microcormos fue de 0,38 % que representan 57 mg de EMS en la solución mutagénica o 57 uL de EMS en la solución (0,56 mM/L). Para la determinación de la dosis letal media se utilizó el método Próbit. Los explantes sobrevivientes fueron micropropagados en el Laboratorio de Biotecnología de la Estación Experimental del Litoral Sur Dr. Errique Ampuero Pareja, hasta completar 10000 plantas. De estos solo se aclimataron 1936 a las cuales se les midió el contenido de clorofila de sus hojas antes de ser inoculados con soluciones miceliales de (Mycosphaerella fijiensis, Morelet) a una concentración de 2,06 x 106 fragmentos de micelio/mL. Este hongo se desarrolló en el Laboratorio de Fitopatología de la misma estación. Posteriormente fueron evaluadas de acuerdo al método de Stover modificada por Ghaul, donde se evaluó el desarrollo y evolución de pizcas de Sigatoka de acuerdo a la escala de Fouré, para determinar el índice de severidad en cada planta y determinar el Promedio Ponderado de Infección (PPI), que es un indicador de resistencia o tolerancia, las plantas con el PPI más bajo fueron identificadas. También se detectaron las variaciones fenotípicas desarrolladas, donde la dosis de 2 %-3h con 2,89 % presentó el mayor número de variaciones fenotípicas seguida por las dosis de 40 y 100 Gy con 1,60 % de variaciones cada una; se evaluó también el tipo de variación que presentó mayor número de plantas las que fueron: “hojas rayadas” con 7,8 %, seguida por “hojas delgadas” con un 2,48 %; por último a los 78 días a estas plantas se les volvió medir el contenido de clorofila para realizar la comparación con la medición inicial dándonos como resultado una baja de la clorofila en la medición final, la que se presume fue debido a la destrucción del área foliar ocasionado por la Sigatoka negra.