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metadata.dc.type: bachelorThesis
Título : Detección temprana de mutantes de banano tolerantes o resistentes a Sigatoka negra (Mycosphaerella fijiensis, Morelet) en condiciones de vivero
Autor : Reyes Borja, Walter Oswaldo
Valarezo Pacheco, Alex Vladimir
Palabras clave : Detección temprana;Mutantes de banano;Sigatoka negra;Vivero
Fecha de publicación : 2015
Editorial : Babahoyo: UTB. 2015
Resumen : Existen varias enfermedades que atacan al banano, pero la principal es la Sigatoka negra (Mycosphaerella fijiensis, Morelet) que es una enfermedad que ataca a las hojas, reduciendo su capacidad fotosintética, bajando de esta manera los rendimientos en las haciendas. Para controlar esta enfermedad se utilizan fungicidas que causan resistencia en esta plaga; además, un gran daño al ambiente y las personas que viven y trabajan en las bananeras. Se han buscado alternativas para controlar esta enfermedad, pero se ha concluido en que el mejoramiento genético es la mejor vía. Convencionalmente llegar a obtener un nuevo genotipo resulta extremadamente difícil en este cultivo, por su esterilidad y partenocarpia, por esta razón es que se ha tomado la alternativa del mejoramiento mediante mutagénesis inducida aplicando mutagénicos físicos y químicos y complementando con la técnica de cultivo de tejidos, para obtener mutantes que presenten resistencia o tolerancia a varias enfermedades. Para este estudio se utilizaron Rayos Gamma y Ethylmethanesulfonate que son agentes, que han sido utilizados en varios estudios ya que pueden provocar mutaciones, las dosis de radiación aplicadas fueron: 0, 20, 40, 50, 60, 70, 80, 100, 120, 140, 150, 160, 180, 200, 250, 300, 350 y 500 Gy. Las dosis aplicadas de EMS fueron: 0, 0.5, 1 y 2 % por dos tiempos: 3 y 6 horas. El material vegetal utilizado para este estudio fueron meristemos apicales y microcormos del cultivar Williams (AAA) perteneciente al subgrupo Cavendish, los cuales se manejarían en condiciones in vitro y de vivero, respectivamente. Estos explantes fueron evaluados a los 30 días posteriores a la aplicación de los mutagénicos, para determinar el porcentaje de mortalidad producido por estos agentes, variable que sirvió para la determinación de la DL50, que en el ensayo con rayos gamma, en los meristemos apicales fue de 56,64 Gy en el irradiador de Quito y 58,32 Gy en el irradiador de Aloag. La DL50 en los microcormos no se pudo determinar ya que la mortalidad fue total. En el ensayo con EMS la DL50 en meristemos apicales fue de 0,83 % que representan 120 mg de EMS en la solución mutagénica o 120 uL de EMS en la solución 4,83 mM/L y en los microcormos fue de 0,38 % que representan 57 mg de EMS en la solución mutagénica o 57 uL de EMS en la solución (0,56 mM/L). Para la determinación de la dosis letal media se utilizó el método Próbit. Los explantes sobrevivientes fueron micropropagados en el Laboratorio de Biotecnología de la Estación Experimental del Litoral Sur Dr. Errique Ampuero Pareja, hasta completar 10000 plantas. De estos solo se aclimataron 1936 a las cuales se les midió el contenido de clorofila de sus hojas antes de ser inoculados con soluciones miceliales de (Mycosphaerella fijiensis, Morelet) a una concentración de 2,06 x 106 fragmentos de micelio/mL. Este hongo se desarrolló en el Laboratorio de Fitopatología de la misma estación. Posteriormente fueron evaluadas de acuerdo al método de Stover modificada por Ghaul, donde se evaluó el desarrollo y evolución de pizcas de Sigatoka de acuerdo a la escala de Fouré, para determinar el índice de severidad en cada planta y determinar el Promedio Ponderado de Infección (PPI), que es un indicador de resistencia o tolerancia, las plantas con el PPI más bajo fueron identificadas. También se detectaron las variaciones fenotípicas desarrolladas, donde la dosis de 2 %-3h con 2,89 % presentó el mayor número de variaciones fenotípicas seguida por las dosis de 40 y 100 Gy con 1,60 % de variaciones cada una; se evaluó también el tipo de variación que presentó mayor número de plantas las que fueron: “hojas rayadas” con 7,8 %, seguida por “hojas delgadas” con un 2,48 %; por último a los 78 días a estas plantas se les volvió medir el contenido de clorofila para realizar la comparación con la medición inicial dándonos como resultado una baja de la clorofila en la medición final, la que se presume fue debido a la destrucción del área foliar ocasionado por la Sigatoka negra.
Descripción : There are several diseases that attack bananas, but the main one is the black Sigatoka (Mycosphaerella fijiensis, Morelet), which attacks the leaves, reducing their photosynthetic capacity, thus lowering the output on farms. Fungicides to control the disease cause pest resistance, great damage to the environment and also to the people who live and work on banana plantations. To control this disease some alternatives have been sought, although genetic improvement is the best way. Conventionally in this crop, to get a new genotype is extremely difficult because of sterility and parthenocarpy conditions, for this reason, improvement through mutagenesis using physical and chemical mutagens and the tissue culture technique as a complement to get resistant or tolerant mutants to diseases have been used. As in several studies to cause mutations, Gamma rays and ethylmethanesulfonate have been used, in this case doses 0, 20, 40, 50, 60, 70, 80, 100, 120, 140, 150, 160, 180, 200, 250, 300, 350 and 500 Gy of radiation were applied. For EMS doses 0, 0.5, 1 and 2% were applied for two times: 3 and 6 hours. The plant material used for this study were apical meristems and microcorms of Williams cultivar (AAA) subgroup Cavendish, which were managed under in vitro conditions and nursery respectively. These explants were evaluated 30 days after application of mutagens to determine the percent mortality produced by these agents. To determine the median lethal dose probit method was used. Thus the LD50 was determined as 56.64 Gy in the Quito´s irradiator and 58.32 Gy in the irradiator of Aloag. The LD50 in microcorms could not be determined because of the total mortality of these plant material. In the assay with EMS, LD50 for apical meristems was 0.83 % that represented 120 mg of EMS in the mutagenic solution or 120 uL of 4.83 mM the EMS / L while in microcorms was 0.38 % representing 57 mg of EMS in the mutagenic or 57 uL solution of EMS in (0.56 mM / L) solution. To complete 10,000 plants, the survivors explants were micropropagated in the Biotechnology Laboratory of the Experimental Station Dr. Errique Ampuero Pareja of INIAP; nevertheless only 1936 were put in nursery where the chlorophyll content of the leaves were measured before being inoculated with mycelial solutions (Mycosphaerella fijiensis, Morelet) of 2.06 x 106 mycelial fragments / mL as concentration. This fungus was developed in the Laboratory of Pathology of the station. In nursery, the banana plants were evaluated according to the Stover’s method modified by Ghaul where the development and evolution of spots of Sigatoka according to the scale of Fouré, was evaluated to determine the severity index in each plant and determine the Weighted Average Infection (PPI), which is an indicator of resistance or tolerance, plants with the lowest PPI were identified. Phenotypic variations were determined, where the dose of 2 % to 2.89 % -3h had the highest number of phenotypic variation followed by doses of 40 Gy and 100 variations with 1.60 % each; furthermore the type of variation presented was analized, thus "striped leaves" with 7.8 % and" long slim leaves" with 2.48 %; Finally, 78 days after, the chlorophyll content was measured again for comparison with the initial measurement, where low chlorophyll in the final measurement was revealed, which was presumable due to the destruction of leaf area caused by black Sigatoka.
URI : http://dspace.utb.edu.ec/handle/49000/1073
Aparece en las colecciones: Tesis-Ingeniería Agropecuaria

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